Thermo Scientific™ RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit

توضیحات

کیت سنتز cDNA رشته اول RevertAid یک سیستم کامل برای سنتز کارآمد cDNA رشته اول از الگوهای RNA است. این کیت برای سنتز cDNA تا 13 کیلوبایت مناسب است. RiboLock RNase Inhibitor که به همراه کیت ارائه می شود، به طور موثر از قالب های RNA در برابر تخریب محافظت می کند.

کیت سنتز cDNA رشته اول RevertAid با پرایمرهای الیگو(dT)18 و هگزامر تصادفی عرضه می شود. آغازگر oligo(dT)18 به طور انتخابی به دم poly(A) mRNA بازپخت می شود. پرایمرهای تصادفی هگزامری نیازی به حضور دم پلی (A) ندارند، بنابراین، می‌توانند برای رونویسی مناطق 5′ انتهای mRNA یا سنتز cDNA گونه‌های RNA فاقد دم پلی (به عنوان مثال، microRNAها) استفاده شوند. ). پرایمرهای اختصاصی ژن نیز ممکن است همراه با کیت استفاده شوند.

این کیت از RevertAid Reverse Transcriptase استفاده می کند که فعالیت RNase H کمتری در مقایسه با AMV reverse transcriptase دارد. بازدارنده نوترکیب RiboLock RNase که به همراه کیت ارائه می شود، به طور موثر از الگوی RNA در برابر تخریب محافظت می کند. این کاملاً با واکنش رونویسی معکوس سازگار است، زیرا فعالیت خود را در دماهای تا 55 درجه سانتیگراد حفظ می کند. الیگو(dT)18 به طور انتخابی روی دم پلی(A) mRNA بازپخت می شود. پرایمرهای هگزامر تصادفی نیازی به حضور پلی (A) ندارند. بنابراین، آنها را می توان برای رونویسی نواحی انتهایی 5 mRNA یا سنتز cDNA با استفاده از RNA بدون دم پلی (A)، به عنوان مثال، میکرو RNA ها استفاده کرد. پرایمرهای اختصاصی ژن نیز ممکن است همراه با کیت ها استفاده شوند. رشته اول cDNA می تواند مستقیماً به عنوان یک الگو در PCR (به پروتکل RT-PCR مراجعه کنید)، PCR بلادرنگ یا در سنتز cDNA رشته دوم (به پروتکل مراجعه کنید) استفاده شود.
cDNA رشته اول تمام طول تا 13 کیلوبایت
افزایش دمای واکنش در محدوده 42 تا 50 درجه سانتی گراد
همراه با بازدارنده نوترکیب RiboLock RNase عرضه شده است
پرایمرهای کامل الیگو(dT)18 و هگزامر تصادفی همراه با کیت
توصیه شده برای:

سنتز cDNA رشته اول برای RT-PCR و RT-PCR بلادرنگ (1، 2). ساخت کتابخانه های cDNA تمام طول. تولید پروب برای هیبریداسیون. سنتز aRNA